组织总磷含量检测试剂盒-组织总磷检测试剂盒-上海液质



上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化elisa土壤植物细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测Elisa代测HPLC 检测GC检测GC-MS 检测LC-MS检测ICP-MS检测 、土壤植物动物成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购


货号:UPLC-MS-4620 规格:100T/96S 微量法
货号:UPLC-MS-4619 规格:50T/48S 可见分光光度法

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 20 mL×1

4℃保存

试剂二

液体 7 mL×1

4℃保存

试剂三

粉剂×2

4℃保存

标准品

液体 1 mL×1

4℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:强腐蚀性,强氧化性;

2 试剂三:临用前配制,加入 5 mL 蒸馏水,溶解后再加入 2.5 mL 试剂二,混匀;

3 标准品:1mmol/L 无机磷标准液。

产品说明:

磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率,进而为合理施肥提供依据。

总磷经消化后,转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法,一定条件下,钼蓝与磷酸根生成660nm 有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量,进而可计算出组织中总磷含量。

技术指标:

*低检出限:0.0338 mmol/L

线性范围:0.625-8 mmol/L

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、蒸馏水和浓硫酸。

操作步骤:

一、有机磷消化(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

称取约 0.1g 组织于带盖试管中,加浓硫酸 1 mL,盖紧(封口膜封口,防止水分散失)后沸水浴 10min 左右, 待溶液呈黑色或棕色时取出。稍冷后,加试剂一 200μL,充分混匀,盖紧后继续沸水浴,直到溶液呈透明状,取出室温冷却后,加蒸馏水 3.8 mL,充分混匀;室温,10000rpm,离心 10min,取上清液,待测。

二、测定步骤

1、分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长到 660 nm,蒸馏水调零。

2、打开水浴锅,调节温度到 40℃。

3、样本测定:

试剂名称(μL

空白管

标准管

测定管

标准液

 

10

 

上清液

 

 

10

蒸馏水

100

90

90

试剂三

100

100

100

混匀后置于 40℃水浴保温 10min,室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度,分别记为 A 空白管、A 标准管、A测定管。

三、组织总磷含量计算

总磷含量(mmol /g  质量)= [C 标准液×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)]×V 总÷W= 0.005×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷W

C 标准液:1 mmol/L;V 总:上清液总体积,5 mL=0.005 L;W:样本质量,g。

注意事项:

1、试剂三需临用前配制,限当天使用。

2、测定前先用 1~2 个样本做预实验,如吸光值大于 1.5 时,需用蒸馏水做相应稀释。


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